實驗設(shè)備

溫室

養(yǎng)蟲籠（40 cm × 50 cm × 60 cm）

體視解剖鏡(Motic 140)

昆蟲針

塑料培養(yǎng)皿(直徑815 cm)

數(shù)碼相機

醫(yī)用注射器

實驗材料

1. 供試植物：盆栽西紅柿

2. 供試昆蟲：B型煙粉虱，麗蚜小蜂，淺黃恩蚜小蜂

實驗步驟

1. 供試昆蟲的培養(yǎng)

    (1) 煙粉虱經(jīng)室內(nèi)分子檢測確認為B 型，室內(nèi)用西紅柿飼養(yǎng)，將西紅柿苗(25 cm 高) 接煙粉虱24 h 后置于養(yǎng)蟲籠(40 cm × 50 cm × 60 cm) 內(nèi)，待煙粉虱生長到一定時間后，取帶柄的葉片，用脫脂棉包裹葉柄基部，在體視解剖鏡下挑除不需要的若蟲，僅保留3齡末和4 齡初若蟲供試驗用；

    (2) 麗蚜小蜂和淺黃恩蚜小蜂室內(nèi)用煙粉虱繁殖多代。蜂發(fā)育到黑蛹期時將其從葉片上用昆蟲針挑下放入鋪有濕潤濾紙的塑料培養(yǎng)皿(直徑815 cm) 內(nèi)備用。

2. 產(chǎn)卵器長度及卵大小的測量及待產(chǎn)卵量統(tǒng)計

    (1) 在內(nèi)置測微尺的體視解剖鏡下(Motic 140) 解剖羽化24 h 內(nèi)的雌蜂，測量雌蜂的產(chǎn)卵器及后足脛節(jié)長度，查數(shù)待產(chǎn)卵數(shù)量并測量卵尺寸(長×寬) ；

    (2) 將羽化后的雌蜂引入(淺黃恩蚜小蜂引入雌雄蜂) 塑料培養(yǎng)皿內(nèi)，供以5 %蜂蜜水，同時內(nèi)置葉柄包裹有濕潤棉球的西紅柿葉片，25 ℃下至第5 天解剖檢查雌蜂體內(nèi)的待產(chǎn)卵量。根據(jù)羽化蜂的多少，每批解剖5～20 頭，解剖3 批。

3. 產(chǎn)卵行為的觀察

    (1) 在Motic 解剖鏡下觀察蜂的產(chǎn)卵行為并記時，寄生蜂觸角接觸到煙粉虱若蟲開始，到檢測完成調(diào)轉(zhuǎn)身體準備將產(chǎn)卵器插入寄主體內(nèi)的時間記為寄主檢測時間；

    (2) 記錄寄生蜂檢測過程中的行為，以檢測圈數(shù)進行統(tǒng)計，產(chǎn)卵器插入到拔出的時間記為產(chǎn)卵時間。

4. 發(fā)育歷期的比較

    (1) 取干凈無蟲的西紅柿苗放置于飼養(yǎng)煙粉虱的環(huán)境中，12 h 后取出，吹干凈上面的煙粉虱成蟲后將苗置于無蟲的養(yǎng)蟲籠內(nèi)室溫條件下飼養(yǎng)，濕度70 %左右；

    (2) 待煙粉虱若蟲發(fā)育至3 齡后取葉片，保持葉片有4 齡初若蟲蟲量大約20 頭，挑除其余若蟲，用數(shù)碼相機拍照后打印出來供標記用，然后將葉柄基部用脫脂棉包裹，用醫(yī)用注射器吸取一定的水注入脫脂棉中；

    (3) 將葉片放入培養(yǎng)皿內(nèi)(直徑: 815 cm) 引入一頭雌蜂(淺黃恩蚜小蜂為交配過的雌蜂，交配過的雌蜂會直接產(chǎn)卵在煙粉虱體內(nèi)，而未交配過的雌蜂不會在煙粉虱體內(nèi)產(chǎn)卵) ，觀察其產(chǎn)卵行為，標記產(chǎn)卵寄生的寄主；

    (4) 每12 h 解剖無法從煙粉虱背部看到孵化的寄生蜂幼蟲或卵的煙粉虱若蟲10 頭，觀察寄生蜂的發(fā)育進度，對可以從背部觀察到的，則直接記錄。寄生蜂化蛹后每12 h 觀察一次記錄化蛹時間，最后統(tǒng)計羽化蜂的數(shù)量。每種蜂接蜂15 頭，觀察所有被寄生粉虱體內(nèi)蜂的發(fā)育。

5. 兩種蜂間的寄主競爭

    (1) 根據(jù)羽化雌蜂的待產(chǎn)卵量，每處理提供4 齡初煙粉虱若蟲10 頭(一張番茄葉片上) ，引入麗蚜小蜂和淺黃恩蚜小蜂雌蜂各一頭，記為Ef Es 處理，同時設(shè)引入兩頭麗蚜小蜂(記為Ef Ef 處理) 或淺黃恩蚜小蜂(記為Es Es 處理) 為對照，放入光照培養(yǎng)箱中， 24 h 后去除蚜小蜂，解剖所有煙粉虱若蟲，每處理重復(fù)25 次，分別記錄每頭寄主體內(nèi)麗蚜小蜂和淺黃恩蚜小蜂的卵量。若某重復(fù)內(nèi)供試煙粉虱被取食數(shù)量超過60 % ，則統(tǒng)計分析時剔除該重復(fù)。

6. 數(shù)據(jù)分析

    (1) 利用SAS910 對數(shù)據(jù)進行分析比較。兩種蜂生物學特性數(shù)據(jù)的比較等用t 測驗進行分析，競爭結(jié)果的數(shù)據(jù)分析中，若是兩組數(shù)據(jù)，則采用t 測驗進行分析比較; 對兩組以上采用ANOVA 進行方差分析，然后采用Tukey’s HSD test 進行平均數(shù)之間的比較。